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液相色譜儀色譜柱使用及維護
每天用足夠的時間來平衡色譜柱，您就會在處理問題方面獲得最大的"補償"，而且您的色譜柱的壽命也會變得更長！------ 一定得做！
新的色譜柱在使用之前應該在您自己的液相色譜儀上進行性能測試，即使用色譜柱附帶的檢驗報告上測試條件和樣品來測定該色譜柱的柱效。并且，在以后的使用中，應時常對色譜柱進行測試。
卡套柱的安裝（不加預柱） 1．將卡套架套入柱芯
2．將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽，使柱芯高于夾套（見左圖）
3．將已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高過夾套片
4．將卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手擰緊
5．然后依同樣的順序連接好柱子的另一端
6．連接到液相色譜儀，PEEK接頭手擰即可；若為不銹鋼接頭應使用專用扳手
注意：使用卡套柱時，兩端的卡套應時刻連接在柱芯上。不管您是平衡色譜柱或是清洗，任何時候都不能將卡套取下來，否則會造成填料的流失。
卡套柱的安裝（加預柱）
1．將卡套架套入柱芯
2．將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽，使夾套高于柱芯（見左圖）
3．將已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高過夾套片
4．將"子彈頭"預柱放入卡套片內
5．將卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手擰緊
6．然后依同樣的順序連接好柱子的另一端
7．連接到液相色譜儀，PEEK接頭手擰即可；若為不銹鋼接頭應使用專用扳手
更換色譜柱濾網和玻璃棉過濾片（同時可以修補色譜柱）
注意：在取出反相柱芯的濾網和玻璃片之前，應該將色譜柱充分用水和甲醇/乙腈沖洗，而且修補工具的頭部也應該蘸取少量的甲醇/乙腈，以避免在取出濾網和玻璃棉濾片時帶出柱子內的填料。
1．將修補工具中的2套入柱芯的頂端
2．將修補工具中的3輕輕地旋入已套著2的柱芯中，并順時針方向旋轉到旋緊
3．一手握柱芯，另一只手輕輕地向外拉3，取出柱芯頂端的濾網
4．用一個小鏟子輕輕地取出濾網下面的玻璃棉以及被污染的填料
5．將新的填料用甲醇潤濕，然后填入挖去的部位，壓平
6．照（左圖）裝上新的玻璃棉濾網，并用修補工具中的4將玻璃棉壓入柱芯頂端
7．柱芯頂端套上2，然后參照（左圖）將濾網放入
8．壓緊，然后取下2，再用4將濾網的邊緣壓平
平衡色譜柱 反相色譜柱在經過出廠測試后是保存在乙腈/水中的。請一定確保您所使用的流動相和乙腈/水互溶。由于色譜柱在儲存或運輸過程中可能會干掉，因此在用流動相分析樣品之前，應使用10－20倍柱體積的甲醇或乙腈平衡色譜柱；如果您所使用的流動相中含有緩沖鹽，應注意用純水"過渡"。
硅膠柱或極性色譜柱在經過出廠測試后是保存在正庚烷中的。如果該色譜柱需要使用含水的流動相，請在使用流動相之前用乙醇或異丙醇平衡
如何平衡色譜柱？
平衡過程中，將流速緩慢地提高
用流動相平衡色譜柱直到獲得穩定的基線（緩沖鹽或離子對試劑度如果較低，則需要較長的時間來平衡）
色譜柱的再生 進行色譜柱再生時，應使用一個謙價的泵，我們建議最好不使用您的高效液相色譜儀上的泵。
表1 建議用來沖洗的溶劑體積
色譜柱尺寸 柱體積 所用溶劑的體積
125-4 1.6ml 30ml
250-4 3.2ml 60ml
250-10 -20ml 400ml
請根據下表選擇您的再生方法：
極性固定相（如Si，NH2*，DIOL基色譜填料）的再生：
正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水**
非極性固定相（如反相色譜填料RP－18，RP－8，CN等）的再生：
水→乙腈→氯仿（或異丙醇）→乙腈→水
0.05M稀硫酸可以用來清洗已污染的色譜柱
注意：
在對NH2改性的色譜柱進行再生時，由于NH2可能成銨根離子的形式存在，因此應該在水洗后用0.1M的氨水沖洗，然后再用水沖洗至堿溶液完全流出。
**如果簡單的有機溶劑/水的處理不能夠完全洗去硅膠表面吸附的雜質，用0.05M稀硫酸沖洗非常有效。
色譜柱的維護
1．使用預柱保護分析柱（硅膠在極性流動相/離子性流動相中有一定的溶解度）
2．大多數反相色譜柱的pH穩定范圍是2－7.5，盡量不超過該色譜柱的pH范圍
3．避免流動相組成及極性的劇烈變化
4．流動相使用前必須經脫氣和過濾處理
5．如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相，應在實驗完畢柱子沖洗干凈，并保存大乙腈中
6．壓力升高是需要更換預柱的信號
